酶標(biāo)儀的維修實(shí)例及使用探討

酶標(biāo)儀在實(shí)際應(yīng)用中很廣泛，如應(yīng)用在臨床鑒別乙肝兩對半，HIV等很多方面。在臨床實(shí)驗(yàn)方面應(yīng)用在鑒定DNA等許多方面，可以說它是臨床及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)*的基礎(chǔ)設(shè)備。

故障一：測量的結(jié)果重現(xiàn)性不好，即使用空板測量誤差也在允許的范圍之外。

故障分析：檢查試劑發(fā)現(xiàn)沒有問題，檢查判定公式也沒有問題，檢查光路也沒有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現(xiàn)卡微板的卡簧在伸縮后沒有卡到位，造成微板在測量時在機(jī)內(nèi)晃動影響測量結(jié)果不準(zhǔn)。

故障二：測量結(jié)果OD值偏低。

故障分析：排除完燈的能量值偏低后，檢查發(fā)現(xiàn)濾光片上有灰塵，用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾干后故障排除。

測試方法：酶標(biāo)儀的儀器指標(biāo)在最佳狀態(tài)，就儀器的精度測試和儀器的線性度介紹幾種測試方法：

精度測試：該過程可被用于檢測不同微板之間的測量精度。使用新制備的在0．1％ TWEEN20中的橘黃色甲基填充微孔，在每個微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個光密度范圍，首先確保每孔注入200mL液體，使用492nm慮光片測量至少3次，對每一微孔進(jìn)行下列計算：(1)平均OD值；(2)高和值；(3)平均值。高和值之間的差值和百分比。讀數(shù)范圍在0．000到2．000Abs。同一孔平均值，高值和低值之間的差值應(yīng)該在+／一1．0％和+／一0．010OD范圍內(nèi)。

讀數(shù)范圍在2．000到3．000Abs同一孔平均值，高和低值之間的差值應(yīng)在+／一1．0％ 和+／一0．005OD值范圍內(nèi)。讀數(shù)范圍在3．000Abs以上時準(zhǔn)確度不符合要求。

儀器線性度：儀器的線性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nIn處測量在0．1％TWEEN20中的橘黃色甲基的稀釋系列，具體方法如下：在參考光密度計上測量被稀釋的溶劑，畫出OD值對已知濃度的點(diǎn)圖，并畫出通過這些點(diǎn)的直線。將從系列稀釋中測得的吸光度值與該圖比較從而計算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250t,-L，對每種稀釋至少使用兩個樣本，以便降低因加樣引起的誤差。

測量微板使用精確測量模式，利用測量得到的平均OD值和每個樣本的已知濃度畫一條OD濃度的曲線，從系列稀釋中測得的吸光值與該曲線比較從而計算出各稀釋度的濃度。對光度記和本儀器，比較計算的濃度，不準(zhǔn)確度不應(yīng)大于以下，使用標(biāo)準(zhǔn)濾光片492nm時吸光度在0．000～2．000Abs+／一1％、2．000～3．000Abs+／一1．5％。使用梯度濾光片492nm時，吸光度在0．000～2．500Abs+／一2％。